间日疟原虫红内期SSUrRNA基因片断的扩增、测序及诊断应用

• 作者: 吴少庭 张仁利 林敏 高世同 龙彩虹
• 来源期刊: 中华国际医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 间日疟原虫 SSUrRNA基因 基因克隆 序列测定
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 159-161
• 页数: 3页
• 分类号: R382.31
• 语种: 中文

摘要

目的体外扩增间日疟原虫(深圳株)红内期小亚单位核糖体核糖核酸编码基因(SSUrDNA)片段,克隆测序分析,并探讨其诊断应用.方法设计1对特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)从间日疟患者血样中扩增出间日疟原虫SSUrDNA片段;用PUC19质粒T载体构建重组子导入大肠杆菌JM109;阳性克隆双酶切鉴定后,双脱氧末端终止法测定序列;以SSUrDNA为靶基因,PCR诊断间日疟,双盲法检测40份血样(28份镜检阳性的血样,12份健康人血).结果间日疟原虫SSUrDNA扩增片段大小约为341bp;阳性克隆双酶切及PCR扩增均得到预期大小的片段;序列测定插入片段为341bp,与SalI株顺序相比,仅在第151位处缺失1个碱基C;以SSUrDNA为靶基因,双盲法检测镜检阳性及健康人血样,结果完全正确.结论所克隆的间日疟原虫SSUrDNA片段序列在间日疟原虫虫株间高度保守,以其为靶基因建立的PCR检测方法适用于间日疟的诊断.