PCNA反义寡核苷酸抑制食管鳞癌细胞株T.Tn体外增殖活性的实验研究

• 作者: 冯伦高 叶世铎 杨林 王家顺 翟伟
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 食管肿瘤 鳞状细胞癌 增殖细胞核抗原 反义 寡核苷酸
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 276-280
• 页数: 5页
• 分类号: R735.1
• 字数: 3864字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2002.03.012

摘要

背景与目的:增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)在食管鳞癌患者中的高表达提示患者的预后不良.本研究拟通过基因反义封闭技术体外抑制PCNA的表达,以达到抑制肿瘤细胞恶性增殖的目的.方法:以食管鳞癌T.Tn细胞株为研究对象,采用硫代磷酸修饰的PCNA反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN),通过脂质体导入T.Tn细胞后,观察PCNAASODN对T.Tn细胞癌基因表达及体外增殖活性的影响.结果:相差显微镜下观察到T.Tn细胞转染ASODN后细胞体积变小,皱缩变形的细胞较对照组明显减少.MTT法测细胞增殖活性见不同浓度ASODN均能抑制T.Tn细胞的增殖,抑制作用在24h最强,0.2μmol/LASODN对细胞的抑制率为63.3%,时间延长抑制作用逐渐减弱.3H-TdR掺入实验表明ASODN能有效地抑制T.Tn细胞的DNA合成.免疫组化SABC法染色提示转染ASODN后T.Tn细胞mRNA的翻译受到抑制,PCNA蛋白表达水平明显降低.FCM检测发现G0-G1期细胞含量由对照组的53.65%增至72.34%,而G2-M和S期细胞则分别从15.51%、30.84%降到9.87%、17.79%.表明PCNAASODN转染导致PCNA促进细胞增殖的功能降低,抑制处于G0期的细胞进入S期.结论:使用人工合成的PCNAASODN可以特异性地抑制食管鳞癌T.Tn细胞株PCNA蛋白的表达,从而调控细胞周期,抑制细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王家顺	华中科技大学同济医学院附属协和医院胸外科	31	87	5.0	7.0
2	杨林	华中科技大学同济医学院附属协和医院胸外科	53	236	9.0	13.0
3	翟伟	华中科技大学同济医学院附属协和医院胸外科	32	88	5.0	7.0
4	叶世铎	华中科技大学同济医学院附属协和医院胸外科	4	23	3.0	4.0
5	冯伦高	华中科技大学同济医学院附属协和医院胸外科	6	13	2.0	3.0