人CTLA-4胞外区cDNA毕赤酵母表达载体的构建及高拷贝稳定整合菌株的筛选

• 作者: 代飞 吴军 易绍萱 朱谨 罗高兴 贺伟峰 陈希炜
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: CTLA-4 毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2002,（8）
• 所属期刊栏目: 器官移植免疫耐受专题
• 页码范围: 679-681
• 页数: 3页
• 分类号: R392.4
• 字数: 2175字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2002.08.016

摘要

目的构建人CTLA-4胞外区蛋白毕赤酵母分泌型表达载体, 获得高拷贝稳定整合菌株,为大量获得人CTLA-4胞外区蛋白,进行功能研究及其临床应用奠定基础.方法从活化人外周血淋巴细胞总RNA中,扩增人CTLA-4基因胞外区cDNA片段,将目的基因插入酵母表达载体pPIC9 α分泌信号下游,再插入高拷贝载体pP IC9K,得到pPIC9K-CTLA4,SaLⅠ线性化后电转GS115;G418梯度筛选转化菌.PCR、Southe rn blotting鉴定目的基因整合及拷贝数.结果成功构建了人CTLA-4胞外区cDNA毕赤酵母表达载体,获得了高拷贝稳定整合菌株.结论为表达人CT LA-4胞外区蛋白及其功能研究和临床应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴军	第三军医大学西南医院烧伤研究所	194	869	14.0	20.0
2	易绍萱	第三军医大学西南医院烧伤研究所	35	253	9.0	14.0
3	罗高兴	第三军医大学西南医院烧伤研究所	36	310	10.0	16.0
4	贺伟峰	第三军医大学西南医院烧伤研究所	32	188	7.0	12.0
5	陈希炜	第三军医大学西南医院烧伤研究所	32	160	7.0	11.0
6	代飞	第三军医大学西南医院烧伤研究所	37	349	10.0	17.0
7	朱谨	第三军医大学西南医院烧伤研究所	2	8	1.0	2.0