肝内胆管癌hTR反义RNA及锤头状核酶基因真核表达载体的构建

• 作者: 刘博 刘师莲 刘贤锡 卢翌 姜希宏 王伟 耿昭 胡海燕 靳斌
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: RT-PCR 反义RNA 核酶 真核表达 载体
• 年，卷（期）: 2002,（16）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3-5
• 页数: 3页
• 分类号: R735.8
• 字数: 2611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2002.16.002

摘要

用反转录PCR法,调取肝内胆管癌细胞内的端粒酶RNA(hTR)基因,并针对其序列设计反义RNA封闭基因及锤头状核酶切割基因序列,将其构建入真核表达载体pTriEx-4内.根据hTR cDNA序列设计引物,经RT-PCR法从体外培养的肝内胆管癌细胞内调取hTR模板区基因,根据其测序结果,合成反义RNA基因及核酶基因,与经相应酶切的真核表达载体连接,酶切鉴定重组体的正确性.经RT-PCR从细胞内调出68bp序列,与hTR cDNA比较,与模板区域碱基序列一致,反义RNA与核酶基因重组子经酶切鉴定序列正确.肝内胆管癌细胞内端粒酶的活性明显增高,RT-PCR法可调出其hTR基因有效片段;成功构建了针对hTR模板区的反义RNA基因和核酶基因的真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	山东大学医学分子生物学实验中心	232	1688	18.0	29.0
2	姜希宏		43	285	10.0	15.0
3	靳斌		38	113	6.0	9.0
4	刘师莲	山东大学医学分子生物学实验中心	33	152	6.0	10.0
5	耿昭	山东大学医学分子生物学实验中心	23	89	6.0	7.0
6	卢翌	山东大学医学分子生物学实验中心	14	74	5.0	8.0
7	刘贤锡	山东大学医学分子生物学实验中心	65	213	7.0	11.0
8	刘博		19	89	6.0	9.0
9	胡海燕	山东大学医学分子生物学实验中心	27	96	5.0	8.0