用λZAP Express作载体构建金针菇子实体表达型cDNA文库

• 作者: 周凯松 常宁 张晗星 张长铠 彭俊峰
• 来源期刊: 菌物系统
• 学科: 生物学
• 关键词: 滴度 重组率 免疫筛选
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 101-106
• 页数: 6页
• 分类号: Q939|Q552
• 字数: 3558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6472.2003.01.024

摘要

采用QuickPrep micro mRNA Purification 试剂盒从新鲜金针菇子实体中快速提取、纯化mRNA,Time Saver cDNA Synthesis试剂盒逆转录成cDNA分子后,通过在cDNA分子两端加上EcoRⅠ/NotⅠ接头,在T4多核苷酸激酶的作用下磷酸化,与表达载体λZAP Express Predigested Vector连接,然后用包装蛋白在体外包装连接产物,感染E.coli XL1-Blue MRF'构建成表达cDNA文库.经检测:文库滴度为4.0×106 pfu/ml,文库扩增后,滴度达2.0×1010 pfu/ml,重组率为90%,cDNA分子长度在0.3-3.5 Kb范围.应用原位免疫杂交,初步筛选出火菇素相关基因的阳性克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张长铠	山东大学微生物技术国家重点实验室	107	1361	21.0	30.0
2	周凯松	山东大学微生物技术国家重点实验室	11	74	6.0	8.0
3	常宁	山东大学微生物技术国家重点实验室	7	34	4.0	5.0
4	彭俊峰	山东大学微生物技术国家重点实验室	6	106	4.0	6.0
5	张晗星	山东大学微生物技术国家重点实验室	12	186	7.0	12.0