两栖动物酒精标本DNA模板的快速提取

• 作者: 曾晓茂 莫邦辉 袁水全 郑渝池 郭骁才
• 来源期刊: 四川动物
• 学科: 生物学
• 关键词: 酒精固定组织 DNA提取 测序
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 66-68
• 页数: 3页
• 分类号: Q75
• 字数: 2191字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7083.2003.02.004

摘要

本文以中国角蟾属4个种的蝌蚪酒精固定标本为材料,取尾部肌肉组织0.1g,滤纸吸干组织块表面的酒精,在研钵中用剪刀剪碎,液氮研磨成粉(必要时可加少量石英砂),转入1.5 ml离心管,加入1.0 ml提取缓冲液(0.5% SDS,10 mmol/L Tris-HCl, 100 mmol/L EDTA, pH 8.0),37℃温浴h,5000 r/min离心10min, 取上清转入另一1.5 ml离心管,氯仿/异戊醇(24:1)抽提两次,上清液加2倍体积预冷(-20 ℃)的无水乙醇沉淀DNA,12 000 r/min离心3min,无菌条件下风干后,50μl TE溶解,4 ℃保存备用.以通用引物PCR扩增12S rRNA和16S rRNA基因部分片段并测序.本文不采用蛋白酶K提取酒精保存标本的DNA模板,全部流程只需3个小时,可同时提取数十个乃至数百个标本,并且所提取的DNA模板适合短片段PCR扩增.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	莫邦辉	中国科学院成都生物研究所	5	59	4.0	5.0
2	袁水全	中国科学院成都生物研究所	2	21	2.0	2.0
6	郑渝池	中国科学院成都生物研究所	10	52	5.0	7.0
7	郭骁才	中国科学院成都生物研究所	15	228	9.0	15.0
8	曾晓茂	中国科学院成都生物研究所	28	371	10.0	18.0