蚕微卫星DNA体外自我扩增条件初步研究

• 作者: 向仲怀 廖芳 李关荣 鲁成
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 蚕 微卫星DNA 基因组自我引发PCR
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 231-235
• 页数: 5页
• 分类号: Q523|S881.2
• 字数: 4203字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2003.03.005

摘要

采用一种类似PCR的基因组自我引发PCR(GSP-PRC)法,初步研究了家蚕、野桑蚕、天蚕、蓖麻蚕和柞蚕的微卫星DNA的体外基因组自我引发PCR扩增条件.质量浓度为100 mg/L的基因组DNA经100℃变性15 min后,与等量相同浓度未变性的DNA混合作为模板,在80 ìL扩增体系[含0.2 mmol/L dNTPs、 50 mmol/L KCl、 10 mmol/L Tris-HCl(pH 9.0)、 4 mmol/L MgCl2、 1.25 U Taq polymerase]中加入1 ìL此混合模板,在92 ℃、1 min→55 ℃、 2 min→72 ℃、 2 min,30～90次累积循环的扩增条件下,成功地得到了PCR产物.反应体系中,基因组DNA的适宜质量浓度为1.25 mg/L.GSP-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后的部分片段回收后,在同样条件下,30～60个循环可得到同样大小范围的产物.GSP-PCR产物经6%的变性测序胶电泳,得到典型的梯状带,表明为微卫星DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁成	西南农业大学蚕学与生物技术学院	106	2273	28.0	43.0
2	向仲怀	西南农业大学蚕学与生物技术学院	66	1439	24.0	35.0
3	李关荣	西南农业大学农学与生命科学学院	18	181	8.0	13.0
7	廖芳	西南农业大学农学与生命科学学院	2	8	1.0	2.0