斜纹夜蛾泛素基因的克隆及表达

• 作者: 师永霞 庞义 李朝飞 潘丽晶 龚映雪
• 来源期刊: 中国昆虫科学（英文版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 斜纹夜蛾 泛素 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 页码范围: 27-34
• 页数: 8页
• 分类号: Q96
• 语种: 英文

摘要

泛素介导的蛋白质降解途径对胞内蛋白的选择性降解起着重要作用.设计一对简并引物,从斜纹夜蛾(Spodoptera litura)细胞中克隆了泛素基因的编码区,GenBank登录号AF436066.序列分析表明,该编码区的长度为228bp,编码由76个氨基酸组成的、分子质量为8.56kD的蛋白,其等电点为6.56.同源性比较发现,斜纹夜蛾泛素基因不仅与其它真核生物的泛素基因在氨基酸水平上具有96%以上的相似性,而且与斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltMNPV)泛素基因的同源性为84%.RT-PCR分析发现,泛素基因在所检测的斜纹夜蛾幼虫多种组织,尤其是脂肪体中均有表达.采用构建的原核表达载体pQEUB,在大肠杆菌M15中诱导并高效表达出了带有His-tag的重组融合蛋白,薄层扫描分析得知靶蛋白约占总蛋白的37%.利用M-NTA亲和层析胶纯化得到重组融合蛋白,经SDS-PAGE鉴定为单一区带,为进一步研究S.litura泛素在SpltMNPV感染中的作用打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘丽晶	中山大学生物防治国家重点实验室	3	2	1.0	1.0
2	李朝飞	中山大学生物防治国家重点实验室	16	88	6.0	9.0
3	庞义	中山大学生物防治国家重点实验室	96	1022	17.0	28.0
4	师永霞	中山大学生物防治国家重点实验室	10	76	4.0	8.0
5	龚映雪	中山大学生物防治国家重点实验室	1	0	0.0	0.0