分化抗原5C5在人免疫细胞的表达

• 作者: 刘音 史耕先 朱立平 汪哌 赵方萄 马凤蓉
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分化抗原 5C5 信号传导
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 341-344
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3602字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2003.05.010

摘要

目的明确5C5蛋白为分化抗原,检测其在人免疫细胞的表达,以及它的信号传导作用. 方法用5C5蛋白免疫小鼠,制备抗5C5蛋白的单抗.用反义技术制备5C5蛋白表达抑制的3D5细胞.用免疫荧光染色和Western印迹确定5C5单抗的特异性.用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定其分化抗原的性质.用双色免疫荧光染色流式细胞术检测5C5分化抗原在多种人免疫细胞的表达.用Fura-3-AM试剂作探针,用激光共聚焦显微镜观察胞内Ca2+浓度的变化. 结果制备了抗5C5蛋白的特异性单抗.用5C5单抗作探针,从3D5细胞膜免疫沉淀到1条相对分子质量(Mr)为19×103的蛋白带,并在活3D5细胞见阳性免疫荧光染色.5C5分化抗原在人周围血CD19+、CD14+、CD4+、CD8+和CD56+细胞的表达率分别为(33.47±7.9)%、(86.13±6.7)%、(15.79±7.1)%、(18.11±12.77)%和(11.76±7.47)%,在人免疫细胞株的表达率分别为58.0% (Nalm6)、72.7% (3D5)、53.6% (BJAB)、61.0% (Daudi)、6.9% (SKW6)、6.3% (Jurkat)、5.8%(Peer)、21.3% (K562)和39.1% (U937).3D5细胞在5C5单抗刺激下,胞内Ca2+浓度逐渐增高,可达2倍左右,对照小鼠Ig则无此作用. 结论5C5蛋白为一个分化抗原,在人周围血CD14+细胞的表达率最高,其次为CD19+细胞,CD4+、CD8+和CD56+细胞的表达率很低.5C5分化抗原有信号传导作用.