苏氨酸操纵子的克隆表达及天冬氨酸激酶的测活

• 作者: 吴海珍 张惠展 沈琼 黄雪峰
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: thrA 天冬氨酸激酶(AKI) 基因表达
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 133-136
• 页数: 4页
• 分类号: Q785|Q556+9
• 字数: 2961字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2003.03.002

摘要

依据途径工程的基本原理,为构建大肠杆菌苏氨酸高产菌林,需强化表达苏氨酸生物合成途径中的关键基因.以Ecoli MC4100染色体DNA为模板,用PCR扩增了天冬氨酸激酶基因thrA部分片段,以之为探针从基因文库中克隆得到thr操纵子,包括启动子、结构基因(thr A、thrB、thrC)、终止子.将结构基因装载于pET-Ⅱa质粒上的T7启动子下游,得到了表达质粒pTHlla-08.转化E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了高效的表达.含表达质粒的菌体胞内粗提液经酶活分析表明,天冬氨酸激酶的活性为含载体质粒pET-Ⅱa的对照菌的100倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张惠展	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	65	477	9.0	20.0
2	吴海珍	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	34	127	7.0	10.0
3	沈琼	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	4	16	3.0	4.0
4	黄雪峰	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	10	1.0	1.0