农杆菌介导甘蔗基因转化技术的优化

• 作者: 张树珍 杨本鹏 罗敬萍
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 农杆菌 GFP 基因 遗传转化 甘蔗
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 页码范围: 23-28
• 页数: 6页
• 分类号: S566.103.53
• 字数: 5172字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2003.04.006

摘要

以甘蔗(Saccharum officinarum L.)品种ROC10为转化受体材料,以GFP基因为报告基因,通过对农杆菌介导遗传转化的一系列条件,包括农杆菌菌株及侵染菌液浓度、侵染时间、受体愈伤组织龄期、AS活化时间及使用浓度、共培养时间等进行优化,同时进行了便于vir基因活化和T-DNA转移的条件组合,如附加果糖和葡萄糖、酸性环境感染,低温共培养等,从而建立了一个可行、有效而又简便的农杆菌介导的甘蔗遗传转化体系.结果表明:农杆菌菌株EHA105优于LBA4404,其适宜侵染浓度D600为1.3752;适宜受体愈伤组织龄期为25℃暗培养25d;适宜侵染时间为30min;适宜AS活化时间为2h,使用浓度为2001μm01·L-1;适宜共培养时间为4d.获得2株有荧光信号的植株,对这2株植株进行斑点Southern杂交检测,均有阳性反应,证明GFP基因已整合到甘蔗基因组中并得到了有效表达,表明该转化体系确实是有效的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨本鹏	中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室	40	669	13.0	25.0
2	张树珍	中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室	79	1288	20.0	33.0
3	罗敬萍	中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室	2	66	2.0	2.0