鸡传染性支气管炎病毒H株纤突蛋白S1基因的克隆及其在毕赤酵母中表达

• 作者: 李校堃 王林川 赵振芬 郑青 黄亚东 黄自然
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒 纤突蛋白S1基因 克隆 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 144-148
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|Q786
• 字数: 3065字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2003.02.011

摘要

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)河南分离株H,经SPF鸡胚增殖,差速离心纯化病毒,SDS-蛋白酶K法抽提病毒RNA.参照IBV Beaudette株纤突蛋白S1基因序列设计并合成引物,以其进行RT-PCR,成功地扩增出IBV H株S1基因.扩增产物经Bst YⅠ、HaeⅢ和PstⅠ酶切分析,结果表明,IBV H株S1基因的RFLP图谱与M41株S1基因的完全一致,初步断定IBV H株为Mass血清型.将IBV H株S1基因克隆于pGEM-T载体中进行序列分析,结果表明该基因全长为1 611bp(从ATG到S前体蛋白裂解位点),与标准株M41和Beaudette的S1基因序列相比较,同源率分别达到97.39%和97.27%.将IBV H株S1基因亚克隆到pPICZ-A表达载体,转化毕赤酵母中,SDS-PAGE实验证实了IBV H株S1基因在毕赤酵母中得以表达,进一步用鸡抗IBV血清做Westernblot检测,证实了表达产物的抗原特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑青	暨南大学医药生物技术研究开发中心	67	505	12.0	19.0
2	李校堃	暨南大学医药生物技术研究开发中心	76	722	14.0	21.0
3	黄自然	华南农业大学蚕桑系	75	1690	22.0	39.0
4	黄亚东	暨南大学医药生物技术研究开发中心	85	740	15.0	23.0
5	王林川	华南农业大学动物医学系	80	521	13.0	18.0
6	赵振芬		8	127	4.0	8.0