人源性抗腮腺炎病毒噬菌体抗体库的构建

• 作者: 俞慕华 叶友松 曾忠铭 段永翔 詹希美 雷智刚 黄锐敏
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 腮腺炎病毒 逆转录聚合酶链反应 电穿孔 噬菌体抗体
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 第五届全国医学分子微生物学学术研讨会征文选登
• 页码范围: 546-548
• 页数: 3页
• 分类号: R512.1
• 字数: 3595字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2003.06.022

摘要

应用噬菌体表面呈现技术,从腮腺炎病毒抗体阳性者淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增出抗体重链Fd和轻链基因,经XhoI/5peI、SacI/XbaI双酶切,先后克隆入噬粒载体pComb3中,再电转化大肠杆菌XL1-blue,以辅助.噬菌体VCSM13进行超感染.从分离出的淋巴细胞中共提取高质量RNA约110μg,经逆转录、PCR,分别扩增出约700 bp大小的κ、λ和Fd基因.PCR产物和载体经纯化、双酶切后进行连接,在2.5 kV、200Ω、25μF的条件下电转化,转化率为2.48×107.最终得到库容量为6.4×106,滴度为7.8×1013 cfu/L的噬菌体抗体库.所构建的抗腮腺炎病毒特异性噬菌体抗体库容量中等大小,能满足从中筛选抗HN蛋白噬菌体抗体的需要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷智刚	中山大学中山医学院病原生物学部	10	38	4.0	6.0
2	詹希美	中山大学中山医学院病原生物学部	86	505	11.0	17.0
3	曾忠铭		28	214	8.0	13.0
4	段永翔		45	267	9.0	14.0
5	俞慕华		49	178	7.0	9.0
6	黄锐敏		35	113	6.0	6.0
7	叶友松		1	2	1.0	1.0