β-肾上腺素受体激动对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶磷酸化的影响

• 作者: A1bert FERRO 刘亚平 姚康 徐标
• 来源期刊: 中国药理学报（英文版）
• 学科: 医学
• 关键词: 脐静脉 β肾上腺素受体 一氧化氮合酶 异丙肾上腺素 蛋白质印迹
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 研究原著
• 页码范围: 219-224
• 页数: 6页
• 分类号: R9
• 语种: 英文

摘要

目的:观察血管内皮β肾上腺素受体激动对内皮一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达及磷酸化水平的影响,阐明β受体激动后eNOS调节的分子机制.方法:异丙肾上腺素(ISO)1 μmol/L与培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)孵育30 min后,裂解细胞并用免疫沉淀法分离eNOS蛋白,运用同位素两步色谱法(L-[3H]精氨酸转化法)检测eNOS活性;蛋白免疫印迹增强化学发光法检测eNOS表达水平和eNOS蛋白丝氨酸磷酸化水平,并观察高选择性β1或β2肾上腺素受体阻断剂对上述作用的影响.结果:ISO与内皮细胞孵育30 min引起eNOS活性增高;不影响eNOS蛋白表达,但丝氨酸磷酸化水平明显增加;选择性β2受体阻断剂ICI 118551可完全阻断ISO的作用,而选择性β1受体阻断剂CGP 20712A无影响.结论:ISO通过提高eNOS丝氨酸磷酸化水平增加eNOS活性,这种作用是通过β2肾上腺素受体介导的.