YFP-CD18融合蛋白在U937细胞株中的表达与鉴定

• 作者: 严鸣 何健 徐仁宝 朱秋峰 毛积芳 钟纪根
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: CD18 Mac-1 YFP 融合蛋白 U937
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-6
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 3302字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2003.04.003

摘要

目的:构建并表达Mac-1的β链CD18与黄色荧光蛋白(YFP)的融合蛋白YFP-CD18,为进一步直视研究Mac-1在白细胞内的分布、走向及归宿提供物质条件.方法:首先将CD18的全长cDNA与pEYFP-C1进行酶切,构建YFP与CD18的N末端连接的表达载体,并将其转染至U937细胞株中进行表达.通过荧光显微镜观察转染成功后的U937细胞黄色荧光是否存在,以及流式细胞术检测确定PMA刺激后YFP-CD18活化后可否由胞浆内转位至膜上和测定PMA活化前后转染的U937细胞与其配基ICAM-1粘附活性的变化等方面来进行鉴定.结果:经酶切鉴定,pYFP-CD18构建正确,转染U937细胞株后,可见YFP-CD18融合蛋白发出的黄色荧光.结论:构建完成YFP-CD18融合基因并可以在U937细胞株中进行表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严鸣		2	0	0.0	0.0
2	毛积芳		2	2	1.0	1.0
3	钟纪根		1	0	0.0	0.0
4	何健	长海医院急救科	1	0	0.0	0.0
5	徐仁宝		2	5	1.0	2.0