小鼠原核胚玻璃化冷冻保存技术的研究

• 作者: 吴通义 周崇 张忠诚 曾申明 朱士恩 权国波
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 受精卵 玻璃化冷冻 小鼠
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 69-73
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.7
• 字数: 3880字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2003.02.002

摘要

目的原核胚是转基因等生物技术所必需的主要材料,其冷冻保存使操作不受时间和空间的限制.另外,冷冻保存还可以避免体外培养过程中的细胞发育阻断期.方法在室温(20℃或25℃)条件下,以乙二醇、DMSO为主体抗冻保护剂配制成的玻璃化溶液(EFS、EDT、EDFS),不借助冷冻仪,对小鼠原核胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存.结果 20℃室温条件下,用EDFS40平衡1 min一步法冷冻解冻后的原核胚,经培养后囊胚发育率最高仅为47%,与新鲜原核体外培养的对照组(75%)的差异极显著(P<0.01);当原核在10%E+10%D溶液中预处理5 min,移入EDFS30中平衡30 s二步法冷冻保存,解冻后的囊胚发育率达68%.而室温升至25℃,二步法冷冻保存后原核胚的囊胚发育率高达77%,与对照组差异无显著性(P>0.05).用最佳冷冻组的原核胚或解冻后培养到囊胚移植给受体母鼠均获得产仔.结论本研究对小鼠原核胚实施玻璃化冷冻保存,经体外培养和移植结果与对照组无显著性差异,证明了本方法的可行性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱士恩	中国农业大学动物科技学院	105	1093	18.0	27.0
2	曾申明	中国农业大学动物科技学院	60	610	13.0	21.0
3	张忠诚	中国农业大学动物科技学院	54	651	14.0	22.0
4	权国波	中国农业大学动物科技学院	3	56	3.0	3.0
5	吴通义	中国农业大学动物科技学院	6	159	6.0	6.0
6	周崇	中国农业大学动物科技学院	3	42	3.0	3.0