中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂C基因的原核表达

• 作者: 劳海华 叶星 白俊杰 简清 罗建仁 马冬梅
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中华鲟 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 原核表达 蛋白酶抑制活性
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 页码范围: 239-244
• 页数: 6页
• 分类号: S917.4
• 字数: 4872字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2003.03.008

摘要

为了研究鱼类半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatm)的功能并探索其在水产品加工和病害防治中的应用潜力,将改造后的中华鲟(Acipenser sinensis)cystatin C cDNA亚克隆到原核表达载体pBV220,构建表达cystatin C的大肠杆菌基因工程菌.该工程菌经温度诱导、SDS-PAGE检测,在约12.4 kD处有一特异蛋白带,该特异蛋白的含量约为菌体总蛋白的25%.重组半胱氨酸蛋白酶抑制剂经洗涤、溶解、透析、复性后纯度为85%,实现了中华鲟cystatin C在大肠杆菌中的高效表达.木瓜蛋白酶活性抑制实验结果表明该重组cystatin C具有明显的酶活抑制作用.