朊蛋白在耐阿霉素胃癌细胞系SGC7901/ADR中的过表达及其意义

• 作者: 乔泰东 刘长江 时永全 曹云新 杜静平 樊代明 赵艳秋 金晓航 陈宝军
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 朊蛋白质类 基因表达 抗药性,多药 胃肿瘤
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 328-332
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3716字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2003.04.020

摘要

目的探讨朊蛋白(PrP)在耐阿霉素胃癌细胞系SGC7901/ADR中过表达及其与胃癌多药耐药性的相关性.方法 (1) 利用Northern 印迹和Western 印迹分别从RNA水平和蛋白质水平检测朊蛋白在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR及其亲本细胞 SGC7901中的表达;(2) 借助DNA重组技术构建朊蛋白基因的正反义真核表达载体;(3) 通过电穿孔方法将正反义真核表达载体分别转入SGC7901和SGC7901/ADR细胞;(4) 以流式细胞仪检测瞬时转染细胞中的阿霉素蓄积和潴留.结果 (1) Northern印迹和Western印迹结果提示朊蛋白在SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达显著高于其在SGC7901中的表达;(2) 将正反义真核表达载体转入SGC7901(命名为PS)和SGC7901/ADR(命名为PA)中,PCDNA3.1空载体转入SGC7901(命名为BS)和SGC7901/ADR(命名为BA);转染48 h后检测转染细胞的平均阿霉素荧光强度,阿霉素蓄积BS为8.9±0.7,PS为6.6±0.3,BA为 5.5±0.7, PA 7.5±0.6,阿霉素潴留BS为8.0±0.7,PS为5.9±0.5,BA 5.1±0.7, PA为7.1±0.5,PS与BS相比两组均为P<0.01,RA与BA相比均为P<0.01表达,并对胃癌细胞,具有统计学意义.结论朊蛋白在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中高表达并对胃癌细胞的药物蓄积有影响.