胆型螺旋杆菌(Helicobacter bilis)的分离、鉴定与序列分析

• 作者: 谢建云 邵伟娟 陈鸿书 高诚
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 胆型螺旋杆菌 序列分析 Koch准则
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 169-173
• 页数: 5页
• 分类号: Q939
• 字数: 1563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2003.02.004

摘要

鉴定分离到的微需氧菌为螺旋杆菌,并对该菌进行分型.小鼠皮下或肌肉注射地塞米松使其免疫抑制,取小鼠肠内容物培养,对分离到的细菌,经油镜、电镜观察.然后提取细菌DNA,用根据螺旋杆菌(Helicobacter sp.)rRNA保守区设计的引物P7/P8进行扩增,并对扩增产物分别用MboI、HhaI、XspI内切酶酶切,酶切产物用10%PAGE分析.再用根据螺旋杆菌胆型(H. bilis)rRNA设计特异引物P7/Pb扩增,将扩增产物测序分析.最后,将该细菌在Scid小鼠上作动物感染.细菌在油镜下呈鸟翼状,电镜下观察到双极鞭毛,无周质纤毛.引物P7/P8扩增出374bp的特异带,此片段能分别被MboI、HhaI、Xsp内切酶酶切.引物P7/Pb扩增出364bp的条带,测得的DNA序列中存在MboI、HhaI、XspI的内切位点,与文献中H.bilis序列比较,同源性为97.5%.动物感染试验符合Koch准则.分离到的细菌确为胆型螺旋杆菌.