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摘要:
利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白VP1基因,经序列测定证实后,构建重组表达质粒pPIC9K/VP1,转化Pichia pastoris酵母宿主菌GS115,甲醇诱导表达.SDS-PAGE分析显示:表达产物的分子量约为34kD,与天然VP1大小一致.凝胶薄层扫描分析显示:目的蛋白表达量占培养上清总蛋白的60%以上.ELISA实验表明,重组蛋白VP1具有较好的抗原性.使用饱和硫酸铵分级沉淀法初步纯化的表达产物,能够较特异性地与EV71感染者血清中的抗体产生反应,而且与抗柯萨奇病毒A16特异性抗体不产生反应.通过利用表达产物作为抗原,对156份血清的检测初步证实,重组蛋白VP1可以作为检测EV71感染的的检测用抗原.
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原核表达
纯化
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文献信息
篇名 肠道病毒71型外壳蛋白VP1在Pichia pastoris酵母中的表达
来源期刊 病毒学报 学科 医学
关键词 肠道病毒71型 VP1 Pichia pastoris酵母 基因表达
年,卷(期) 2003,(2) 所属期刊栏目 人与动物病毒
研究方向 页码范围 114-117
页数 4页 分类号 R373.3|Q786
字数 3415字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-8721.2003.02.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 金奇 19 225 7.0 14.0
2 杨国威 2 28 1.0 2.0
3 薛颖 2 28 1.0 2.0
4 周世力 1 27 1.0 1.0
5 马骊 1 27 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
肠道病毒71型
VP1
Pichia pastoris酵母
基因表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
病毒学报
双月刊
1000-8721
11-1865/R
大16开
北京西城区迎新街100号
82-227
1985
chi
出版文献量(篇)
2313
总下载数(次)
18
总被引数(次)
25071
相关基金
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:http://www.863.org.cn
项目类型:重点项目
学科类型:信息技术
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