核因子-κB反应性不稳定增强型绿色荧光蛋白报告系统的建立与应用

• 作者: 刘昕 徐祥 梁华平 王付龙 王正国
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: 基因表达调控 不稳定增强型绿色荧光蛋白 κB基序 核因子-κB 寡核苷酸
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 78-83
• 页数: 6页
• 分类号: Q743|R365|R45
• 字数: 4566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2003.01.015

摘要

建立核因子-κB(NF-κB)反应性不稳定增强型绿色荧光蛋白(d2EGFP)报告系统,作为筛选NF-κB拮抗药物及研究其相关信号转导途径的工具.分别以EGFP与d2EGFP为报告基因、neor为筛选基因,构建成4×κB基序为增强子、SV40为基本启动子的报告基因载体p4κB-EGFP和p4κB-d2EGFP.两载体分别与p65载体瞬时共转染HEK293细胞,通过比较不同时相点EGFP和d2EGFP的调控表达,证明p4κB-d2EGFP是较理想的NF-κB反应性绿色荧光蛋白(GFP)报告基因载体.将p4κB-d2EGFP稳定转染HEK293细胞,从而获得NF-κB反应性报告细胞株HEK-d2EGFP.应用NF-κB"圈套"寡核苷酸(TFD)与p65载体瞬时共转染HEK-d2EGFP,1 mg/L NF-κB和2 mg/L NF-κB TFD组对p65蛋白诱导调控表达的d2EGFP具有明显拮抗作用.结果表明,NF-κB反应性d2EGFP报告系统可特异、灵敏、动态地反映和监测NF-κB的活性变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王正国	第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所	258	3149	27.0	43.0
2	徐祥	第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所	50	402	11.0	17.0
3	梁华平	第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所	67	683	15.0	23.0
4	刘昕	第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所	39	295	9.0	15.0
5	王付龙	第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所	3	21	2.0	3.0