ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力

• 作者: 任恕 吴晓明 周宜开 徐顺清 郝巧玲
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA修复 蛋白质类 苯并芘 RNA,反义 肺肿瘤 肿瘤细胞,培养的
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 167-170
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2130字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0253-9624.2003.03.006

摘要

目的探讨核苷酸切除修复基因ERCC1在肺癌细胞修复苯并(a)芘所致DNA损伤中的作用.方法构建表达ERCC1反义RNA的重组质粒,Lipofectin转染肺癌A549细胞,潮霉素筛选出稳定转染的细胞克隆;噻唑蓝法检测24 h细胞生存力;Northern Blot分析细胞ERCC1基因mRNA表达水平;单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤程度,每组计算50个细胞损伤情况.结果筛选出表达ERCC1反义RNA的7个阳性克隆,其生长特性与亲本细胞差别无显著性;内源性mRNA表达水平不同程度降低,为亲本细胞的12%～86%;DNA损伤修复速度减慢,10μmol/L苯并(a)芘作用24 h后再孵育24 h,修复程度为亲本细胞的29%～71%;相关分析表明DNA损伤修复程度与ERCC1mRNA水平显著相关.结论ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力.