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犬腺病毒、犬细小病毒联合PCR方法的建立与应用
犬腺病毒、犬细小病毒联合PCR方法的建立与应用
作者:
刘维全
卫广森
夏咸柱
扈荣良
王雷
邹啸环
黄耕
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
犬腺病毒1型(CAV-1)
犬腺病毒2型(CAV-2)
犬细小病毒(CPV)
联合PCR
摘要:
根据GenBank报道的犬腺病毒(CAV)和犬细小病毒(CPV)序列,设计两对联合PCR引物,其中一对为CAV-1和CAV-2通用引物,另一对为CPV引物.在建立单项PCR基础上,通过优化Mg2+离子浓度和循环参数等反应条件建立联合PCR,确定联合PCR条件为:96℃180s,96℃30s,56℃30s,72℃80s,30个循环.联合PCR结果显示:CAV-1扩增片段大小为497bp,CAV-2为1 019bp,CPV为719bp;细胞和其它相关病毒对照均无扩增带.上述PCR产物经用限制性内切酶酶切和克隆测序,结果均与相应病毒的应有条带和序列相同.敏感性比较试验结果表明,联合PCR比用细胞培养分离病毒敏感.将联合PCR应用于15份CAV和CPV细胞培养物,5份CAV-1、1份CAV-2和3份CPV人工感染犬病料以及30份临床病料检测,并与电镜负染、HA/HI及病毒分离等方法的结果进行比较,结果显示,联合PCR的检出率和病毒分离结果一致,高于电镜负染和HA/HI试验.以上结果说明:CAV-1/CAV-2和CPV联合PCR不仅具有很好的特异性和敏感性,而且可以在短时间内(2.5h~3h)同时鉴定出上述三种病毒,因此具有良好的实验室诊断和临床应用价值.
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文献信息
篇名
犬腺病毒、犬细小病毒联合PCR方法的建立与应用
来源期刊
病毒学报
学科
农学
关键词
犬腺病毒1型(CAV-1)
犬腺病毒2型(CAV-2)
犬细小病毒(CPV)
联合PCR
年,卷(期)
2003,(3)
所属期刊栏目
人与动物病毒
研究方向
页码范围
262-266
页数
5页
分类号
S852.655
字数
3287字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:1000-8721.2003.03.015
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
王雷
48
172
9.0
12.0
2
邹啸环
10
115
7.0
10.0
3
夏咸柱
30
195
10.0
12.0
4
黄耕
12
89
6.0
9.0
5
扈荣良
16
81
5.0
8.0
6
卫广森
24
120
7.0
9.0
7
刘维全
9
92
5.0
9.0
传播情况
被引次数趋势
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研究主题发展历程
节点文献
犬腺病毒1型(CAV-1)
犬腺病毒2型(CAV-2)
犬细小病毒(CPV)
联合PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
病毒学报
主办单位:
中国微生物学会
出版周期:
双月刊
ISSN:
1000-8721
CN:
11-1865/R
开本:
大16开
出版地:
北京西城区迎新街100号
邮发代号:
82-227
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
2313
总下载数(次)
18
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