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胰岛素样生长因子-1与血小板源生长因子-AA以及肿瘤生长因子β1基因克隆及其在腺病毒载体中的表达
胰岛素样生长因子-1与血小板源生长因子-AA以及肿瘤生长因子β1基因克隆及其在腺病毒载体中的表达
作者:
杨德鸿
瞿东滨
金大地
陈建庭
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
生长物质
成骨细胞
基因
腺病毒,人
摘要:
目的从正常的人体成骨细胞中克隆IGF-1、PDGF-AA和TGFβ1三因子的编码蛋白基因,构建上述因子基因的高效表达重组腺病毒,旨在为基因治疗研究提供有效的工具.方法培养正常人体成骨细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR方法获得IGF-1、PDGF-AA和TGFβ1的编码基因.将这些片段克隆到高效表达腺病毒载体Adeno-X,并经过HEK293细胞的包装,获得成熟的重组腺病毒.Western 印迹法检测上述三因子的表达.利用成熟重组腺病毒感染成骨细胞,检测细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的改变.结果重组T载体、重组腺病毒DNA和成熟的重组腺病毒体中均可得到IGF-1、PDGF-AA和TGFβ1基因的PCR片段.Western印迹检测到上述3种因子蛋白质的表达.当携带上述3种因子的重组腺病毒感染成骨细胞后,细胞增殖明显增强,ALP活性明显提高.结论本实验构建的IGF-1、PDGF-AA和TGFβ1因子的高效表达重组腺病毒可以在人体细胞中表达出具有生物活性的蛋白质,获得了较好的基因工具.
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篇名
胰岛素样生长因子-1与血小板源生长因子-AA以及肿瘤生长因子β1基因克隆及其在腺病毒载体中的表达
来源期刊
中华医学杂志
学科
生物学
关键词
生长物质
成骨细胞
基因
腺病毒,人
年,卷(期)
2003,(10)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
853-858
页数
6页
分类号
Q7
字数
4669字
语种
中文
DOI
10.3760/j:issn:0376-2491.2003.10.012
五维指标
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引文网络
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节点文献
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成骨细胞
基因
腺病毒,人
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
中华医学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
周刊
ISSN:
0376-2491
CN:
11-2137/R
开本:
大16开
出版地:
北京市西城区宣武门东河沿街69号
邮发代号:
2-588
创刊时间:
1915
语种:
chi
出版文献量(篇)
21130
总下载数(次)
49
总被引数(次)
205305
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
广东省自然科学基金
英文译名:
Guangdong Natural Science Foundation
官方网址:
http://gdsf.gdstc.gov.cn/
项目类型:
研究团队
学科类型:
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