反义IGF-ⅠR基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的流式细胞仪分析和电镜观察

• 作者: 傅先明 汪业汉 牛朝诗
• 来源期刊: 现代神经疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 癌基因 寡核苷酸类,反义 神经胶质瘤 脱噬作用 受体,胰岛素样生长因子-Ⅰ 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 胶质瘤的基础与临床研究
• 页码范围: 26-29
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3374字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6731.2003.01.006

摘要

目的探讨反义胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-Ⅰ R)基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的作用及其形态学的变化.方法根据IGF-Ⅰ R cDNA序列设计其正义、反义基因片段,并对部分碱基进行硫代磷酸修饰.实验分为空白对照组、正义寡核苷酸组和反义寡核苷酸组,应用流式细胞仪检测DNA含量,根据DNA直方图分析凋亡细胞发生率.应用透射电镜观察凋亡细胞的形态学变化.结果经反义寡核苷酸5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L等4种浓度处理的胶质瘤细胞的凋亡率分别为(16.06±3.86)%、(24.52±4.84)%、(36.69±5.53)%和(43.85±5.72)%;而经同样浓度正义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞的凋亡率分别为(3.76±1.22)%、(3.14±1.15)%、(2.51±0.93)%和(3.26±1.15)%;空白对照组(野生型)的自然凋亡率为(1.01±0.89)%.反义寡核苷酸组与空白对照组相比差异有显著性意义(P＜0.05),而正义寡核苷酸组与空白对照组之间差异则无显著性意义(P＞0.05).透射电镜观察显示,凋亡细胞表现为细胞体积缩小,染色质凝聚,并聚集于核膜下呈新月状或块状,胞膜内陷形成膜包裹的核碎片或细胞器,最后出泡形成凋亡小体.结论反义IGF-Ⅰ R基因片段可诱导胶质瘤细胞发生凋亡.