体外定向诱导小鼠胚胎干细胞发育为造血干/祖细胞方法的初步研究

• 作者: 何志旭 周其峰 李树浓 黄绍良
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 造血干细胞 骨髓细胞 分化 小鼠
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 443-447
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2+8
• 字数: 4359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2003.04.003

摘要

目的:探讨体外定向诱导胚胎干细胞(ESC)发育为造血干细胞(HSC)的方法.方法: 将小鼠E14胚胎干细胞在含干细胞生长因子(SCF)和血管内皮生长因子(VEGF)的甲基纤维素培养基中首先诱导发育为胚胎体(EB),再将EB置于均含SCF、VEGF、IL-3、IL-6及促红细胞生成素(EPO)的3种不同培养体系中定向分化为HSC,并观察HSC表面标志性抗原、造血集落形成及瑞氏-姬姆萨染色的结果.结果: 经两阶段诱导ESC分化为HSC,发现在甲基纤维素半固体培养体系中HSC发育缓慢,分化14 d 后CD34+/Sca-1+细胞数最高为(31.5±4.7)%;而在骨髓基质细胞饲养层上HSC发育较快,细胞数量较多,分化第10 d CD34+/Sca-1+细胞数即达到峰值,为(47.8±6.3)%;骨髓基质细胞饲养层+胎肝基质细胞上清培养体系中HSC发育同样迅速,所产生的CD34+/Sca-1+细胞数量在3个体系中最高,为(53.6±7.2)%.经瑞氏-姬姆萨染色证实上述细胞为早期造血细胞,均有形成各系造血细胞集落的能力.结论: 使用骨髓基质细胞饲养层+胎肝基质细胞上清培养体系及SCF、VEGF、IL-3、IL-6及EPO等细胞因子,通过两阶段诱导分化,可从小鼠ESC获得较高比例的HSC.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄绍良	中山大学附属二院儿科	148	897	15.0	19.0
2	李树浓	中山大学中山医学院病理生理学教研室	38	248	9.0	14.0
3	周其峰	中山大学中山医学院免疫学教研室	2	37	2.0	2.0
4	何志旭	中山大学附属二院儿科	4	37	3.0	4.0