流行性乙型脑炎病毒GSS株prM、E和NS1蛋白基因的克隆及在非复制型痘苗病毒中的表达

• 作者: 付士红 李仁清 梁国栋 王世峰 王文玲 辛伟 邓瑶 阮力 陆振华 陆柔剑
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 流行性乙型脑炎病毒 非复制型痘苗病毒 表达
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 210-216
• 页数: 7页
• 分类号: R373.3|Q78
• 字数: 4848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2003.03.005

摘要

克隆流行性乙型脑炎(乙脑)病毒野毒(JEV)GSS株前膜蛋白信号序列、前膜蛋白(prM)、包膜蛋白(E)、非结构蛋白-1(NS1)和非结构蛋白NS2a的编码基因,并与非复制型痘苗病毒载体NTV进行同源重组,构建了乙脑病毒非复制型重组痘苗病毒疫苗株NTVA(E/L)JEV.通过PCR和Southern blot检测证明,在非复制型痘苗病毒中有乙脑病毒prM信号序列、prM、E、NS1和NS2a基因的插入:Western blot检测证明,重组病毒可以在细胞内成功地表达prM、E和NS1蛋白,并可将prM、E和NS1蛋白分泌到细胞培养上清中;免疫荧光检测证明,E和NS1蛋白主要分布在细胞膜上.电镜下可见分泌到细胞外的病毒样颗粒.