cmv-3′LTR嵌合启动子对逆转录病毒载体MFG滴度及外源基因表达的影响

• 作者: 卢健 戴冰冰 杨蓉 梅文瀚 王家敏 钱关祥
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 逆转录病毒载体 基因表达 嵌合启动子 长末端重复序列
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 235-239
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 3692字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2003.03.009

摘要

为减轻逆转录病毒载体介导的外源基因的沉默,进一步提高逆转录病毒载体MFG介导的外源基因的表达水平,同时探讨逆转录病毒3′端长末端重复序列(long-terminal repeat,LTR)内U3区对病毒基因表达的影响,将逆转录病毒载体3′端LTR内的U3区用cmv核心增强子、启动子序列替代,同时去除了3个与逆转录病毒载体启动子甲基化有关的序列NCR、DR,并以egfp为报告基因,构建了MFG-egfp和MFG-egfp-cmv表达载体.结果显示:利用cmv启动子替代MFG载体3′端LTR的U3启动子序列,会显著降低MFG载体的病毒滴度及其介导的外源报告基因的表达.提示利用cmv启动子替代病毒载体的3′端LTR内的U3区,并不是提高MoMLV(moloney murine leukemi virus)逆转录病毒载体介导外源基因的表达及其病毒滴度的理想策略.结果也同时提示:在MoMLV逆转录病毒3′端LTR的U3区,可能存在与病毒RNA加工、成熟及稳定性有关的信号序列.