犬2型腺病毒E3区表达载体的构建

• 作者: 夏成柱 孙阳 尹惠琼 张守峰 扈荣良 王雷 范泉水 邱薇 高玉伟
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬2型腺病毒 E3区 表达载体
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 8-11,15
• 页数: 5页
• 分类号: Q784|Q786
• 字数: 3567字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2003.01.003

摘要

利用构建的犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因和狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36 h即可观察到荧光,72～96 h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光的细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48～96 h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白的表达,而pBE3LGFP和pBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建的E3区缺失性载体不能利用E3区自身的启动子进行目的基因的表达,但利用外源性启动子可使外源基因获得良好表达.