转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞基质金属蛋白酶2及其组织抑制因子2表达的改变

• 作者: 于鸿 张秀荣 汪怡 王小刚 郭慕依 陈琦
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转染 明胶酶A 金属蛋白酶2组织抑制剂 肾小球膜 DNA结合蛋白质类
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 544-547
• 页数: 4页
• 分类号: R36
• 字数: 3452字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-5807.2003.06.012

摘要

目的通过对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell,MsC)转染Smad 7基因,观察转染阳性细胞克隆基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其组织抑制因子2(TIMP-2)表达的改变,以进一步阐明Smad 7阻断肾组织纤维化过程的作用机制.方法经脂质体介导将含有Smad 7重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western印迹分析、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法鉴定;又分别采用Western印迹分析、酶谱分析法和RT-PCR法,检测转染阳性细胞克隆MMP-2和TIMP-2表达改变.结果成功建立高表达Smad 7的阳性MsC克隆(S-22,S-26),并证实其MMP-2蛋白分泌和酶活性均明显升高,而TIMP-2 mRNA及其蛋白的表达则被明显抑制.阳性MsC克隆S-22,S-26细胞分泌MMP-2比对照组高约3.8倍(P<0.01);S-22与S-26细胞TIMP-2蛋白表达约为对照组48%(P<0.05).结论 Smad 7可能通过增强肾组织内MMP-2酶活性和抑制TIMP-2的生成而起到减轻肾组织纤维化进展的作用.