斜带石斑鱼生长激素cDNA克隆及其在大肠杆菌中的融合表达

• 作者: 张为民 张利红 张勇 李欣 田静
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 斜带石斑鱼 生长激素 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 页码范围: 391-397
• 页数: 7页
• 分类号: Q785|S917
• 字数: 2980字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2003.05.001

摘要

通过构建斜带石斑鱼垂体cDNA文库,克隆了其生长激素(GH)全长cDNA.斜带石斑鱼GH全长cDNA为955bp,编码的多肽为204 aa.应用PCR方法把编码GH成熟肽的cDNA片段克隆到表达载体pET-15b,在大肠杆菌BL21(DE3)表达N端含6个组氨酸的融合多肽.SDS-PAGE结果表明,0.4 mmol@L-1IPTG诱导表达的蛋白约为24 kDa,主要为不溶性的包含体.细菌裂解液沉淀溶于6 mol@L-1盐酸胍后,用Ni2+-NTA树脂进行亲和分离纯化,纯化产物在SDS-PAGE上表现为一条24 kDa的蛋白带.在黑鲷GH放射免疫分析系统中,纯化产物能与黑鲷GH竞争结合GH抗体,表明大肠杆菌表达的斜带石斑鱼GH融合多肽具有GH免疫活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张勇	中山大学生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁育重点实验室	95	749	15.0	23.0
2	李欣	中山大学生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁育重点实验室	106	762	13.0	23.0
3	张利红	中山大学生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁育重点实验室	12	204	9.0	12.0
4	张为民	中山大学生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁育重点实验室	21	511	12.0	21.0