反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系端粒酶活性的抑制作用

• 作者: 卢学春 徐周敏 李琦 赵亚力 郝好杰 韩为东 马学斌
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 反义hTERT 端粒酶 真核表达载体 人肺巨细胞癌细胞系
• 年，卷（期）: 2003,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 932-937
• 页数: 6页
• 分类号: R734
• 字数: 4497字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2003.09.008

摘要

背景与目的:近几年的研究表明,端粒酶在肿瘤的发生中扮演着重要角色.人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse trascriptase,hTERT)是端粒酶活化的惟一限制性组分.本研究探讨hTERT全长cDNA反义序列转染对人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D恶性表型的逆转作用.方法:应用基因重组技术构建包含hTERTcDNA全长序列的反义hTERT真核表达载体pcDNA3.1(-)-hERT,用脂质体转染人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D,通过生长曲线比较转染反义hTERT后PLA-801D细胞的增殖能力,应用逆转录-聚合酶链反应方法检测hTERT mRNA的表达水平,并应用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法检测端粒酶活性.结果:成功地构建了pcDNA3.1(-)-hTERT的反义真核表达载体,并转入到PLA-801D细胞中.转染反义hTERT的细胞较未转染及转染空质粒细胞的生长增殖能力显著降低(P＜0.05);转染组细胞中野生型hTERT mRNA的表达被抑制,其相对表达量仅为对照组细胞的15.7%,转染组细胞中端粒酶活性较对照细胞下降了约82.4%.结论:hTERT cDNA的全长反义序列可以抑制PLA-801D细胞hTERT mRNA的表达水平和端粒酶活性,限制PLA-801D细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵亚力	解放军总医院基础所分子生物室	93	443	10.0	17.0
2	李琦	解放军总医院基础所分子生物室	46	267	9.0	14.0
3	马学斌	解放军总医院基础所分子生物室	10	37	3.0	5.0
4	郝好杰	解放军总医院基础所分子生物室	45	183	7.0	10.0
5	韩为东	解放军总医院基础所分子生物室	113	744	13.0	23.0
6	卢学春	解放军总医院血液科实验室	90	756	15.0	21.0
7	徐周敏	解放军总医院血液科实验室	12	126	7.0	11.0