人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达和活性检测

• 作者: 岳凤鸣 徐群渊 杨慧 赵焕英 高福禄
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人胰岛素样生长因子Ⅰ 克隆 表达 生物活性
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 306-311
• 页数: 6页
• 分类号: Q578|Q78
• 字数: 5681字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2003.03.018

摘要

目的克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型(hIGF-1),构建真核表达载体并进行表达及活性检测,为IGF-1基因治疗糖尿病奠定基础.方法提取胎儿肝脏总RNA,RT-PCR法扩增IGF-1cDNA片段,重组于pUCM-T载体,测序正确后构建表达载体,转染猴肾成纤维细胞系COS-7,用原位杂交和免疫组织化学检测表达,收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定.结果扩增得到710 bp带有Kozak序列的IGF-1cDNA片段;成功构建了真核表达载体pCI-neo/hIGF-1;IGF-1在COS-7细胞得到了表达,并具有刺激胰岛素分泌的活性.结论新构建的载体pCI-neo/hIGF-1能在COS-7细胞中表达、分泌,且所分泌的IGF-1具有生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高福禄		98	478	12.0	16.0
2	杨慧	首都医科大学北京神经科学研究所	124	633	13.0	17.0
3	徐群渊	首都医科大学北京神经科学研究所	140	593	11.0	17.0
4	赵焕英	首都医科大学北京神经科学研究所	55	178	7.0	11.0
5	岳凤鸣	河北医科大学组织学胚胎学教研室	8	74	5.0	8.0