摘要:
目的探讨钙蛋白酶抑制剂PD150606对鼠氧化性白内障的预防作用和钙蛋白酶在H2O2诱发白内障鼠的晶状体上皮细胞(LEC)凋亡过程中的作用.方法将健康清洁级SD大鼠的120只离体透明晶状体随机均分为2组,实验组加含2 mmol/L H2O2和0.1 mmol/L PD150606的培养液,对照组加含2 mmol/L H2O2的培养液.于6、12、24 h,分别检测2组鼠晶状体的透明度及相对灰度值;微量Folin酚法检测2组晶状体蛋白质中水溶性蛋白(WSP)所占比例;流式细胞仪术检测2组晶状体中LEC数目;蛋白电泳结合免疫印迹法检测LEC中天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3的表达.结果加入培养液后24 h内,实验组晶状体混浊程度较对照组明显好转.6、12及24 h,实验组晶状体相对灰度值增大,与对照组比较,差异有显著意义(t=2.285,4.834,5.737;均P<0.05);12和24 h,实验组 WSP在晶状体蛋白质中所占比例下降程度有所减小,与对照组比较,差异均有非常显著意义(t=1.398,3.260,3.260;均P=0.009);加入培养液后6、12及24 h,实验组 LEC凋亡数目减少,与对照组比较,差异均有非常显著意义(t=6.268,5.759,5.397;均P<0.01);6、12及24 h,实验组半胱氨酸蛋白酶-3的表达减弱,与对照组比较,差异有非常显著意义(t=11.637,5.648,6.369;均P<0.01).结论钙蛋白酶抑制剂PD150606可部分抑制H2O2诱发的离体鼠晶状体混浊、蛋白水解及LEC凋亡,钙蛋白酶的激活在氧化性白内障的发生中有一定作用.钙蛋白酶可能通过水解晶状体蛋白和激活半胱氨酸蛋白酶3诱导LEC凋亡,以诱发白内障.