以大肠埃希氏菌肽脱甲酰基酶为靶点的高通量筛选模型的建立

• 作者: 司书毅 唐先兵 张月琴
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 肽脱甲酰基酶 高通量筛选模型 放线酰胺素
• 年，卷（期）: 2003,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 621-626
• 页数: 6页
• 分类号: R965.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8689.2003.10.005

摘要

本文用PCR法从大肠埃希氏菌K-12中克隆出肽脱甲酰基酶(peptide deformylase,PDF)基因,通过测序确证与文献报道的pdf基因序列完全一致.将pdf连接到原核蛋白表达载体pET-30-a(+)上,并转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)菌株中,IPTG诱导表达.过量表达的PDF酶用Q Sepharose HP离子交换柱和Superdex 75纯化得到高纯度Ni-PDF.应用荧光测试仪PolarFluostar检测PDF对底物For-Met-Ala-Ser的水解活性,PDF酶的已知抑制剂放线酰胺素(actinonin)为阳性对照,通过优化酶反应条件,建立了以PDF为靶点的高通量药物筛选模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐先兵		2	13	2.0	2.0
2	司书毅		8	64	6.0	8.0
3	张月琴		10	68	6.0	7.0