人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达

• 作者: 范丽安 颜卫华
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HLA-G 克隆 点突变 K562
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 7-10
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9
• 字数: 3421字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2003.01.002

摘要

目的克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G,HLA-G)突变体cDNA,并使其在HLA-Ⅰ类阴性的K562细胞上获得稳定表达,为研究配-受体之间的识别机制奠定基础.方法用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-G cDNA,得到全长HLA-G PCR产物后,用桥式PCR方法进行定点点突变,将突变的目的基因亚克隆于逆转录,将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体,采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞,最后经G418筛选及有限稀释,利用单克隆抗体W6/32进行FACS及mRNA检测,观察HLA-G突变体在靶细胞表面的表达.结果 HLA-G突变体分子在经mG-pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达.结论成功构建了mG-pLNCX表达载体,并使HLA-G突变体分子在HLA-Ⅰ类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范丽安	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	43	284	10.0	14.0
2	颜卫华	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	8	49	3.0	6.0