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摘要:
目的克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G,HLA-G)突变体cDNA,并使其在HLA-Ⅰ类阴性的K562细胞上获得稳定表达,为研究配-受体之间的识别机制奠定基础.方法用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-G cDNA,得到全长HLA-G PCR产物后,用桥式PCR方法进行定点点突变,将突变的目的基因亚克隆于逆转录,将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体,采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞,最后经G418筛选及有限稀释,利用单克隆抗体W6/32进行FACS及mRNA检测,观察HLA-G突变体在靶细胞表面的表达.结果 HLA-G突变体分子在经mG-pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达.结论成功构建了mG-pLNCX表达载体,并使HLA-G突变体分子在HLA-Ⅰ类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达.
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文献信息
篇名 人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达
来源期刊 免疫学杂志 学科 医学
关键词 HLA-G 克隆 点突变 K562
年,卷(期) 2003,(1) 所属期刊栏目 基础免疫学
研究方向 页码范围 7-10
页数 4页 分类号 R373.9
字数 3421字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-8861.2003.01.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 范丽安 上海第二医科大学上海市免疫学研究所 43 284 10.0 14.0
2 颜卫华 上海第二医科大学上海市免疫学研究所 8 49 3.0 6.0
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研究主题发展历程
节点文献
HLA-G
克隆
点突变
K562
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
免疫学杂志
月刊
1000-8861
51-1332/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩
78-32
1985
chi
出版文献量(篇)
4652
总下载数(次)
25
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
论文1v1指导