摘要:
对蓝狐卵母细胞成熟时间和超数排卵后卵母细胞的发育阶段进行了研究.采集间情期(11~12月份)蓝狐卵巢,用切割法回收卵泡中的卵母细胞,每个卵巢平均获得8个卵丘卵母细胞复合体(COCs:cumulus oocyte complexes,480个卵/60个卵巢).COCs在成熟液(TCMI99+10%FCS+10 μg/L EGF+10IU/mL PMSG+10IU/mL hCG)培养,并在不同时间将卵母细胞固定、染色观察其成熟阶段.结果表明,核网期卵母细胞在培养前的比例为80.70%(P<0.01);GV期卵母细胞在培养24 h比例最高(34.04%,P<0.01);GVBD期卵母细胞也是在培养24 h比例较高(44.68%,P<0.05);M Ⅰ期卵母细胞在培养48~120 h比例较高(P<0.05),48 h最高(30.00%);MⅡ期卵细胞在培养72~96 h比例较高(P<0.05),72 h比例最高(29.41%);卵母细胞在培养120 h退化比例最高(22.22%,P<0.01).因此,间情期卵母细胞体外培养72~96 h为最佳.对繁殖季节(3月份)蓝狐进行超排处理,回收卵巢卵泡中卵母细胞及输卵管、子宫角的卵母细胞,固定、染色,观察其所处的发育阶段.母狐皮下注射500 IU PMSG,48 h后皮下注射250 IU hCG,一组在72 h后屠宰,结果表明,母狐卵巢体积虽然有所增大,但没有排卵,将卵泡中卵母细胞固定染色后镜检,卵母细胞大多在核网期(72.22%),而GV(11.1%)、GVBD(11.11%)和M Ⅰ期(5.56%)较少;另一组母狐在144 h左右发情,148 h再次注射500IU PMSG,167 h皮下注射250 IU hCG,并进行人工授精,187 h屠宰,发现输卵管和子宫角中卵母细胞被多层卵丘颗粒细胞包裹,而卵泡中的卵母细胞大多在核网期(33.33%)和GV期(41.67%),GVBD(16.67%)和M Ⅰ期(8.33%)较少;输卵管中冲出卵母细胞主要处在GV期(100%),子宫角中的卵母细胞处于GV、GVDB和M Ⅰ期;子宫角冲出的卵母细胞在体外培养72 h后,仍然处于GV、GVBD和M Ⅰ期.