表达禽流感病毒核蛋白基因重组禽痘病毒的构建及其免疫保护性研究

• 作者: 乔传玲 于康震 唐秀英 姜永萍 孟庆文 张建林 田国斌 邓国华
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 重组禽痘病毒 核蛋白基因 免疫保护性
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 704-708
• 页数: 5页
• 分类号: S85
• 字数: 3710字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2003.06.019

摘要

从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)核蛋白(NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段,将其亚克隆到pSY538质粒,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY538质粒,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段,再亚克隆到禽痘病毒载体pSY681,从而构建出表达核蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体pSY(NP+LacZ).应用脂质体介导的方法将转移载体转染已感染禽痘病毒S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞,在X-gal存在的条件下,利用蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化以及PCR、Western-blot鉴定,结果证明,获得了能高效表达AIV NP蛋白的重组禽痘病毒rFPV-NP.SPF鸡体内的免疫保护试验结果表明,它能够诱导机体产生较高水平的NP特异性抗体,并对H5N1和H7N1这2种亚型高致病力禽流感病毒的攻击提供一定的保护.