人高密度脂蛋白受体胞外片段在甲醇酵母中的表达

• 作者: 李元 洪斌 胡箭
• 来源期刊: 遗传学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 高密度脂蛋白受体 Pichia pastoris
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 人类与医学遗传学
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 3971字
• 语种: 中文

摘要

高密度脂蛋白受体在胆固醇逆向运输中起重要作用,并且其可以做为动脉粥样硬化的新型治疗靶点.为了构建以竞争性受体-配体相互作用为基础的体外高通量药物筛选模型,在甲醇酵母中表达了高密度脂蛋白受体胞外结构域.应用RT-PCR方法从人肝癌Bel-7402总RNA中扩增了编码高密度脂蛋白受体胞外结构域的基因片段,此基因片段经测序证实后亚克隆至甲醇酵母分泌表达质粒pPIC9K中.经测序验证读码框正确后将重组质粒电转至Pichia pastoris GS115中.应用PCR方法确定目的基因的整合和Mut+表型.重组菌株用1%甲醇诱导5天后取发酵上清进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果表明,在分子量约64.5 kDa处有sHDLR表达.随后应用DiI-AcLDL为配体证明了表达的sHDLR具有结合其配体AcLDL的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪斌	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	20	168	7.0	12.0
2	李元	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	25	115	6.0	9.0
3	胡箭	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	1	2	1.0	1.0