pET28a-TAT-LacZ重组子的构建

• 作者: 严世荣 严洁 邱云城 龚坚
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: pET28a质粒 TAT蛋白转导区 TAT-β-Gal融合蛋白 平滑肌细胞
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 141-144
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2615字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2003.02.005

摘要

为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT- β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌, 利用组氨酸亲和层析柱纯化TAT-β-Gal融合蛋白,将融合蛋白加入培养的平滑肌细胞.得到高度纯化的、有活性的TAT-β-Gal融合蛋白, TAT-β-Gal在短时间内进入体外培养平滑肌细胞,成功地构建了高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,并在体外培养的细胞中证实TAT- β-Gal融合蛋白穿透生物膜的能力,为肽类、生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱云城	郧阳医学院附属十堰市人民医院检验部	1	16	1.0	1.0