人三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ基因的克隆与表达

• 作者: 姜重建 张宇新 徐群渊 杨慧 杨秋慧 江小华 苏玉金
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ RT-PCR 原位杂交 人胚肝脏
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 349-352
• 页数: 4页
• 分类号: Q189
• 字数: 2573字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2003.04.003

摘要

目的研究人三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ(GCHⅠ)基因在多巴胺代谢过程中的作用. 方法从人胚胎肝脏中提取总RNA,以RT-PCR法扩增GCHⅠ cDNA,克隆于PGEM-T-easy载体中,测序正确后再构建真核表达载体,转染猴肾成纤维细胞系COS7,原位杂交检测其表达. 结果 RT-PCR扩增出904bp的cDNA,并成功构建真核表达载体pCI-neo-GCHⅠ,原位杂交证实其在COS7表达阳性率为70%～80%. 结论 GCHⅠ有望用于帕金森病的基因治疗.