日本对虾精巢和卵巢全长cDNA文库的构建

• 作者: 张子平 王艺磊
• 来源期刊: 动物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: cDNA文库 精巢 卵巢 日本对虾
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-13
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2867字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0250-3263.2003.02.003

摘要

采用RDP试剂提取日本对虾精巢和卵巢的总RNA,经Oligotex试剂盒纯化得到mRNA.根据SMART(switching mechanism at 5'end of RNAtranscript)技术,利用含SfiⅠ B酶切位点的oligo(dT)引物合成cDNA第一条链,利用含SfiⅠ A酶切位点的SMART核苷酸作为cDNA第一条链在mRNA 5'端延伸出去的模板,采用LDPCR引物合成双链cDNA,双链cDNA用SfiⅠ酶切和过柱分级分离后,与λ TriplEx2两臂进行连接,随后进行λ噬菌体体外包装反应,构建成精巢和卵巢之全长cDNA文库.构建好的文库中,精巢的文库含有约1.04×106的重组子,卵巢的文库含有约为1.2×106的重组子.文库扩增后,滴度分别达7.3×108(Pfu/ml)和9.1×108(Pfu/ml),插入cDNA长度为400bp～3kb,说明两文库均具有良好的质量,为进一步筛选、克隆精巢与卵巢特异表达基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王艺磊	集美大学水产生物技术研究所水产学院	80	1300	17.0	35.0
2	张子平	香港城市大学生物与化学系	11	234	8.0	11.0