重组人脑髓鞘碱性蛋白及其抗体的研究

• 作者: 刘戟 王若菡 陈俊杰 陈建业
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人脑髓鞘碱性蛋白(MBP) 表达载体 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 64-67
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3186字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-5515.2003.01.018

摘要

将EcoR1和Sal I酶切的人脑髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA克隆片段与表达载体pGEX-5T重组后转化大肠杆菌,经筛选,增殖和IPTG诱导,阳性克隆SDS-PAGE结果证实表达一条特异42 KDa区带,Western印记杂交证实该区带具MBP抗原特异性,免疫斑点杂交和ELISA检测表达产量占菌体可溶性蛋白含量6%,达414.6 mg/L菌液.将含可溶性MBP蛋白的菌液行SDS-PAGE分离纯化得重组MBP抗原,对新西兰兔进行背部皮下多点注射,5次免疫后以琼脂板免疫双扩法检测抗体效价达1∶16,并通过免疫斑点杂交和Western印迹杂交证实该抗体具抗MBP特异性.