环状芽孢杆菌乳糖酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质分析

• 作者: 姚斌 张伟 操时树 王亚茹 王元火 范云六 袁铁铮
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 环状芽孢杆菌 乳糖酶 基因表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 83-88
• 页数: 6页
• 分类号: Q814
• 字数: 4824字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2003.01.018

摘要

将环状芽孢杆菌(Bacillus circulaus)中的乳糖酶基因在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行了高效表达,并测定了表达的乳糖酶的基本酶学性质.结果表明,表达的乳糖酶有生物学活性,但与来源于环状芽孢杆菌的原始酶相比,其酶促反应的最适pH、最适温度、Km值,以及酶的pH稳定性和温度稳定性等酶学性质均有较大变化.表达的乳糖酶最适pH为5.0,低于原始酶的pH 6.5;最适温度为37℃,而原始酶为55℃;其耐酸性、耐热性及对金属离子的抗性等方面比原酶有所提高;而且表达的乳糖酶Km比原始酶小285倍、Vmax比原始酶大5.4倍,表明经大肠杆菌表达的乳糖酶有较高的底物亲和力,酶促反应效率更高.从乳糖酶的单位表达量来看,原始酶在环状芽孢杆菌的表达量为20.98 U/mL,而在大肠杆菌中的表达量提高到33.102U/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
2	范云六	中国农业科学院生物技术研究所	74	2436	27.0	48.0
3	王亚茹	中国农业科学院饲料研究所	30	682	17.0	25.0
4	袁铁铮	中国农业科学院饲料研究所	18	500	13.0	18.0
5	王元火	中国农业科学院饲料研究所	2	107	2.0	2.0
6	操时树	中国农业科学院饲料研究所	10	212	5.0	10.0
7	张伟	中国农业科学院生物技术研究所	77	419	13.0	18.0