肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1表达及转录调控的影响

• 作者: 朱广瑾 李晓冬 王雯 祖淑玉
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病理学 肿瘤坏死因子α对内皮细胞的作用 基因重组 纤溶酶原激活物抑制剂1 基因表达 AP-1元件 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 194-198
• 页数: 5页
• 分类号: R36
• 字数: 4805字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2003.03.003

摘要

探讨肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1活性和mRNA表达的影响,以及纤溶酶原激活物抑制剂1基因5'上游序列的调控元件在该基因转录调控中的作用.体外培养人脐静脉内皮细胞,加入不同浓度肿瘤坏死因子α作用不同时间.采用发色底物法测定纤溶酶原激活物抑制剂1活性,Northern印迹分析法测定纤溶酶原激活物抑制剂1 mRNA水平.基因重组技术构建四个含人纤溶酶原激活物抑制剂1基因不同长度5'上游序列的荧光素酶报告基因质粒,瞬时转染进入内皮细胞,并测定荧光素酶的表达情况. 运用聚合酶链反应和序列分析法对构建质粒上的三个AP-1元件分别进行定点突变.结果发现,不同浓度肿瘤坏死因子α作用人脐静脉内皮细胞后,纤溶酶原激活物抑制剂1活性和mRNA表达量均明显增高;当转染质粒含有纤溶酶原激活物抑制剂1基因上游序列-1509/+90和-823/+90时,肿瘤坏死因子α使转染细胞的荧光素酶表达量比对照组明显增高;当转染质粒含有-553/+90和-47/+90时,肿瘤坏死因子α的诱导作用不明显.在纤溶酶原激活物抑制剂1 5'上游序列的三个AP-1元件突变后,肿瘤坏死因子α的诱导作用明显降低.结果提示,肿瘤坏死因子α增强血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1活性与mRNA表达;纤溶酶原激活物抑制剂1活性提高与其mRNA表达增加呈正相关;纤溶酶原激活物抑制剂1 5'上游序列中三个AP-1元件在肿瘤坏死因子α对纤溶酶原激活物抑制剂1诱导中具有重要调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	祖淑玉	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院	17	151	7.0	12.0
2	朱广瑾	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院	55	364	9.0	16.0
3	王雯	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院	19	55	4.0	6.0
4	李晓冬	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院	4	13	2.0	3.0