8-氯腺苷通过磷酸化修饰提高转录因子CREB的活性

• 作者: 刘彤 方家椿 王耐勤 畅晓燕 苏虹
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 8-氯腺苷 肿瘤 转录因子
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 350-353
• 页数: 4页
• 分类号: R73.3
• 字数: 3941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2003.04.003

摘要

背景与目的:8-氯腺苷是国内新近研发的抗肿瘤药物,其分子作用机制尚未完全阐明.本实验研究该药对 HL- 60细胞转录因子 cAMP应答元件结合蛋白 (cAMP- response- element- binding protein, CREB)活性的影响及其相关机制.方法:应用 MTT法检测 8-氯腺苷对人早幼粒细胞白血病细胞株 HL- 60的半数抑制浓度( IC50),用蛋白印迹实验( Western blot analysis)检测药物作用不同时间 CREB蛋白水平和 CREB磷酸化水平,用凝胶阻滞实验( Gel shift assay)检测药物作用不同时间 CREB与 DNA的结合水平.结果: (1)8-氯腺苷对 HL- 60细胞的 IC50约为 0.42 μ mol/L. (2)8-氯腺苷快速诱导 CREB磷酸化, 30 min达到最高水平, 6 h恢复至基础水平, CREB蛋白水平在药物作用期间保持恒定. (3)8-氯腺苷不改变 CREB与 DNA结合能力.结论: 8-氯腺苷诱导 CREB转录因子活性的提高依赖于 CREB磷酸化水平的提高,而与 CREB蛋白水平及 CREB与 DNA的结合水平无关.