晚期糖基化终产物修饰人血清白蛋白对人血管内皮细胞的生长抑制作用

• 作者: 乔亮 刘英开 史济湘 向军 姚敏 廖镇江 施桂英 林炜栋 董叫云 陆树良 陈向芳 青春
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖基化终产物,高级 内皮,血管 脱噬作用
• 年，卷（期）: 2003,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 572-576
• 页数: 5页
• 分类号: R587
• 字数: 4077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2003.07.013

摘要

目的探讨晚期糖基化终产物(AGE)在糖尿病难愈创面形成和发展中的作用机制.方法将人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞与不同浓度的AGE修饰人血清白蛋白(AGE-HSA)在体外共同培养.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、锥虫蓝排斥实验和活细胞计数检测AGE-HSA对血管内皮细胞的生长抑制作用.采用Annexin V Fitc 和碘化丙啶(PI)染色,通过流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,同时应用荧光共聚焦显微镜观察凋亡或死亡细胞Annexin V Fitc和PI的荧光染色;利用透射电镜和光镜观察AGE-HSA对内皮细胞的形态学影响.结果内皮细胞经12.5 、25和50 μg/ml AGE-HSA干预2 d后,各干预组细胞数与对照组比较无明显差异(均P>0.05),而于4 d和6 d后明显低于对照组,细胞增殖抑制率显著上升.内皮细胞经100或200 μg/ml AGE-HSA干预6、12、24、48 h后,MTT法测其吸光度A值在各时相点均显著低于对照组(P<0.01),同时内皮细胞出现特异性的凋亡形态学变化,Annexin V Fitc阳性和/或PI阳性的细胞逐渐增多,流式细胞仪测定的各时相点凋亡细胞百分率均显著高于对照组(P<0.01),且凋亡或死亡细胞数量随AGE-HSA作用时间及浓度的增加而增多.结论 AGE-HSA能抑制内皮细胞增殖,并可以诱导其凋亡,而且与作用时间及浓度相关.AGE可能是引起糖尿病难愈创面新生血管化障碍或者延迟的重要致病因素之一.