人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定

• 作者: 冯公侃 刘宗潮 朱孝峰 沈竞康 王鸿鹤 谢冰芬
• 来源期刊: 中山大学学报(医学科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞周期蛋白D1 CDK4
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 444-447
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2525字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2003.05.008

摘要

[目的]构建表达人细胞周期蛋白 D1及细胞周期蛋白激酶 CDK4融合蛋白的重组体.[方法]用 RT- PCR从 HL- 60细胞中扩增细胞周期蛋白 D1及 CDK4基因片段,克隆到 pGEM - T easy载体上.测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体 pET- 22b(+ )上,重组质粒转化大肠杆菌 BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白 D1及 CDK4.SDS- PAGE电泳及 Western blotting鉴定表达蛋白.[结果] 用 PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成 pET- cyclin D1和 pET- CDK4两个原核表达载体.将其转化大肠杆菌, Western blot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白 D1及 CDK4融合蛋白.[结论] 本研究成功构建了细胞周期蛋白 D1及 CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白 D1及 CDK4融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘宗潮	中山大学肿瘤防治中心实验研究部	27	310	10.0	16.0
2	沈竞康	中国科学院上海药物研究所	10	103	6.0	10.0
3	朱孝峰	中山大学肿瘤防治中心实验研究部	34	267	9.0	14.0
4	谢冰芬	中山大学肿瘤防治中心实验研究部	13	134	6.0	11.0
5	冯公侃	中山大学肿瘤防治中心实验研究部	21	173	7.0	12.0
6	王鸿鹤	中山大学肿瘤防治中心实验研究部	8	107	6.0	8.0