异亮氨酸拉链结构对可溶性CD40L生物学活性的影响

• 作者: 丁天 周璇 张学光 徐颖 江培翃 洪洁 钱志康 黄伟达
• 来源期刊: 复旦学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 可溶性CD40L 异亮氨酸拉链结构 表达 生物学活性
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 页码范围: 564-569,575
• 页数: 7页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3797字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0427-7104.2003.04.010

摘要

CD40配基(CD40L)为TNF超家族中的一员,瞬时表达于激活的CD4+的T淋巴细胞上. 自然状态下膜上三聚体的CD40L通过和CD40受体(CD40 R)结合,在免疫监视和肿瘤免疫中发挥作用. 以PCR方法从pcDNA3-CD40L质粒上扩增得到编码CD40L基因的胞外部分sCD40L,并将该片段插入大肠杆菌表达质粒pET30a上,构建得到大肠杆菌表达质粒pET30a-sCD40L;同时,在sCD40L的N端融合了异亮氨酸拉链(Isoleucine Zipper,IZ)结构,构建得到表达质粒pET30a-IZ-sCD40L. 表达质粒在大肠杆菌中表达,得到可溶性的重组人CD40L和IZ-CD40L. SDS-PAGE分析结果表明重组人rhsCD40L和IZ-rhsCD40L在相应分子质量位置都有明显的条带产生,并得到Western blotting的确认. 非SDS-PAGE电泳结果显示,异亮氨酸拉链结构有利于rhsCD40L蛋白形成聚合体结构. B细胞增殖实验和人骨髓瘤细胞株XG2凋亡实验结果都表明,异亮氨酸拉链结构提高了rhsCD40L的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学医学生物技术研究所	399	1957	18.0	24.0
2	黄伟达	复旦大学生命科学学院	57	398	13.0	15.0
3	徐颖	苏州大学医学生物技术研究所	94	702	11.0	22.0
4	江培翃	复旦大学生命科学学院	9	52	4.0	7.0
5	钱志康	复旦大学生命科学学院	7	37	4.0	6.0
6	周璇	苏州大学医学生物技术研究所	21	21	3.0	3.0
7	丁天	复旦大学生命科学学院	3	14	2.0	3.0
8	洪洁	复旦大学生命科学学院	4	24	3.0	4.0