人尿激肽原酶的纯化与鉴定

• 作者: 孙奋勇 汪炬 洪岸 谢秋玲
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 人尿激肽原酶 人尿胰蛋白酶抑制剂 乙醇沉淀 胶体沉淀 离子交换 疏水层析 亲和层析 慈菇蛋白酶抑制剂
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 772-777
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3908字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2003.05.022

摘要

采用两性离子胶体沉淀和乙醇沉淀相结合的粗提方法,经离子交换、疏水层析、亲和层析及凝胶过滤4个步骤有效地将人尿激肽原酶(hk-1)粗提物纯化,比活提高了1 755倍,总得率为70%.用以慈菇蛋白酶抑制剂为配体的亲和层析纯化hk-1,效果理想,整个工艺路线适合产业化生产.纯化产物在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上为单带,高压液相色谱(HPLC)上为单峰,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测得分子质量为33 450 u,等电聚焦测得pI在4.3附近,为含糖蛋白.同时测定了该酶的热稳定性和pH稳定性.纯化过程中同时分离得到另一种药用蛋白--人尿胰蛋白酶抑制剂(HUTI).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪岸	暨南大学生物工程研究所	107	856	14.0	25.0
2	孙奋勇	暨南大学生物工程研究所	67	545	11.0	20.0
3	谢秋玲	暨南大学生物工程研究所	60	665	13.0	24.0
4	汪炬	暨南大学生物工程研究所	39	289	11.0	16.0